負(fù)染色所屬現(xiàn)代詞,指的是一種制備電子顯微鏡樣品圖像呈現(xiàn)負(fù)反差的技術(shù)。

外文名

negative staining

性質(zhì)

電子染色的一種方法

應(yīng)用

病毒等生物大分子的觀察方法。

正文

中文名稱(chēng):負(fù)染色

英文名稱(chēng):negative staining

定義:一種制備電子顯微鏡樣品圖像呈現(xiàn)負(fù)反差的技術(shù)。用于觀察樣品中的顆粒性物質(zhì)或生物大分子。用重金屬鹽(如磷鎢酸鈉、醋酸鈾等)對(duì)鋪展在載網(wǎng)上的樣品進(jìn)行染色,使整個(gè)載網(wǎng)都鋪上一層重金屬鹽,而有凸出顆粒的地方則沒(méi)有染料沉積。染色后,在電鏡下觀察時(shí),被觀察的對(duì)象為亮的,背景為暗的,反襯出樣品中的生物大分子及其復(fù)合物的形態(tài)。

所屬學(xué)科:細(xì)胞生物學(xué)(一級(jí)學(xué)科) ;細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)(二級(jí)學(xué)科)

簡(jiǎn)介

用重金屬鹽(如磷鎢酸鈉、醋酸鈾等)對(duì)鋪展在載網(wǎng)上的樣品進(jìn)行染色,使整個(gè)載網(wǎng)都鋪上一層重金屬鹽,而有凸出顆粒的地方則沒(méi)有染料沉積。由于電子密度高的重金屬鹽包埋了樣品中低電子密度的背景,增強(qiáng)了背景散射電子的能力以提高反差,這樣,在圖像中背景是黑暗的,而未被包埋的樣品顆粒則透明光亮,這種染色稱(chēng)為負(fù)染技術(shù)。負(fù)染色是只染背景而不染樣品,與光學(xué)顯微鏡樣品的染色正好相反。

應(yīng)用

電子染色的一種方法,背景是高電子密度區(qū),樣品是低電子密度區(qū),在電鏡下形成負(fù)的反差,主要用于病毒等生物大分子的觀察方法。

染色原理

負(fù)染色法需要使用酸性染料來(lái)染色,如伊紅或苯胺黑。因?yàn)榧?xì)菌體表面帶負(fù)電,而酸性染料的色原也帶負(fù)電,所以色原只能將背景染色,才能使沒(méi)有染色的細(xì)胞很容易的被觀察到。一些染色劑,如四氧化鋨和鐵氰化鋨,化學(xué)活性非常強(qiáng)。作為強(qiáng)氧化劑,它們主要與交鍵類(lèi)脂和不飽和碳碳鍵反應(yīng),從而改變樣本組織的生物膜特性并將其染色。