IMViC試驗(yàn)是靛基質(zhì)試驗(yàn)、甲基紅試驗(yàn)，乙二酰試驗(yàn)、檸檬酸鹽利用試驗(yàn)的縮寫(xiě)，常用于鑒定腸道桿菌，尤其對(duì)革蘭染色反應(yīng)和培養(yǎng)特性相同或相似的細(xì)菌更為重要。主要用于鑒別大腸桿菌和產(chǎn)氣腸桿菌，多用于水的細(xì)菌檢驗(yàn)。

中文名

IMViC試驗(yàn)

原理

分解蛋白胨中的色氨酸形成吲哚

實(shí)驗(yàn)方法

試劑盒法、試管法、斑點(diǎn)試驗(yàn)法

實(shí)驗(yàn)結(jié)果

試劑盒法：呈紅色反應(yīng)

簡(jiǎn)介

靛基質(zhì)（吲哚）試驗(yàn)

大腸IMViC試驗(yàn)

原理

某些細(xì)菌有色氨酸酶，能分解蛋白胨中的色氨酸形成吲哚（靛基質(zhì)），吲哚能與對(duì)二甲基氨基苯甲醛作用生成玫瑰吲哚而呈紅色。

實(shí)驗(yàn)方法

試劑盒法：將對(duì)二甲基氨基苯甲醛加入細(xì)菌蛋白胨水培養(yǎng)液中。（注：不能搖晃試劑盒）

試管法：以接種環(huán)將待檢菌新鮮斜面培養(yǎng)物接種于Dunham氏蛋白胨水溶液中，置37℃培養(yǎng)24~48h（可延長(zhǎng)4~5d）；于培養(yǎng)液中加入戊醇或二甲苯2~3mL，搖勻，靜置片刻后，沿試管壁加入Ehrlich氏或Kovac氏試劑2mL。

斑點(diǎn)試驗(yàn)法：將一片濾紙放在培養(yǎng)皿的蓋子上或一張載玻片上，滴加1~1.5mL試劑液于濾紙上使其變濕，取18~24h瓊脂平板培養(yǎng)物涂布于浸濕的濾紙上，在1~3min內(nèi)觀察。

試驗(yàn)結(jié)果

試劑盒法：呈紅色反應(yīng)，形成玫瑰吲哚，為吲哚試驗(yàn)陽(yáng)性。不出現(xiàn)紅色則為陰性。

試管法：出現(xiàn)紅色顏色變化為陽(yáng)性。不出現(xiàn)紅色則為陰性。

斑點(diǎn)試驗(yàn)法：棕色的試劑由紫紅變?yōu)榧t色者即為陽(yáng)性。

甲基紅（MR）試驗(yàn)

原理

某些細(xì)菌在糖代謝過(guò)程中，分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸，丙酮酸進(jìn)一步被分解成為甲酸、乙酸、琥珀酸等，使培養(yǎng)基pH下降至4.5以下，加入甲基紅指示劑可呈紅色。如細(xì)菌分解葡萄糖產(chǎn)酸量少，或產(chǎn)生的酸進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為其他物質(zhì)（如醇、醛、酮、氣體和水），培養(yǎng)基pH在5.4以上，加入甲基紅指示劑呈橘黃色。本試驗(yàn)常與V-P試驗(yàn)一起使用，因?yàn)榍罢叱赎?yáng)性的細(xì)菌，后者通常為陰性。

試驗(yàn)方法

取一種細(xì)菌的24h培養(yǎng)物，接種于葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基中，置37℃培養(yǎng)48~72h，取出后加甲基紅試劑（甲基紅0.02g，95%酒精60mL，蒸餾水40mL）3~5滴，立即觀察結(jié)果。如果培養(yǎng)液呈紅色者為陽(yáng)性，橙色者為可疑，黃色者為陰性。

試驗(yàn)結(jié)果

培養(yǎng)液呈紅色者為陽(yáng)性，橙色者為可疑，黃色者為陰性。

二乙酰（V-P）試驗(yàn)

原理

某些細(xì)菌能發(fā)生如下轉(zhuǎn)換：葡萄糖→丙酮酸（脫羧）→乙酰甲基甲醇（Acetymethyl?carbinol）→2，3—丁烯二醇（2,3—bytaylene?cylycol），在有堿存在時(shí)氧化成二乙酰，后者和胨中的胍基化合物起作用產(chǎn)生粉紅色的化合物。本試驗(yàn)?zāi)康脑谟跍y(cè)定細(xì)菌產(chǎn)生乙酰甲基甲醇的能力。大腸埃希菌與產(chǎn)氣腸桿菌均能分解葡萄糖，產(chǎn)酸產(chǎn)氣，為區(qū)分兩菌可采用V-P試驗(yàn)及甲基紅試驗(yàn)。

試驗(yàn)方法

O’Meara’s法：將被檢細(xì)菌接種于葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基后，于35~37℃培養(yǎng)48h，于每毫升培養(yǎng)物中加入0.1mL試劑（40g?KOH溶于100mL蒸餾水中，加入0.3g肌酐即成），猛烈搖振混合。

Baritt’法：同上法接種培養(yǎng)細(xì)菌，于2mL培養(yǎng)液內(nèi)加入甲液（6%α-萘酚酒精溶液）1mL和乙液（40%?KOH）0.4mL，搖振混合。

試驗(yàn)結(jié)果

試驗(yàn)時(shí)強(qiáng)陽(yáng)性者約于5min后，可產(chǎn)生粉紅色反應(yīng)。如長(zhǎng)時(shí)間無(wú)反應(yīng)，置室溫過(guò)夜，次日不變者為陰性。

枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)

原理

當(dāng)細(xì)菌利用銨鹽作為唯一氮源，并利用枸櫞酸鹽作為唯一碳源時(shí)，若細(xì)菌能利用這些鹽作為氮源和碳源而生長(zhǎng)，則能利用枸櫞酸鈉產(chǎn)生碳酸鹽，從而與利用銨鹽產(chǎn)生的氨反應(yīng)，形成NH4OH，使培養(yǎng)基呈堿性，使指示劑溴麝香草酚藍(lán)（BTB）由淡綠轉(zhuǎn)為深藍(lán)。

試驗(yàn)方法

Simmons氏培養(yǎng)基法：將被檢細(xì)菌少量接種到培養(yǎng)基中，37℃培養(yǎng)2~4d，觀察培養(yǎng)基顏色變化。

Christenten氏培養(yǎng)基法：將被檢細(xì)菌少量接種到培養(yǎng)基中，接種時(shí)先劃線后穿刺，孵育于37℃觀察7d，觀察培養(yǎng)基顏色變化。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果

Simmons氏培養(yǎng)基法：培養(yǎng)基變藍(lán)色，陽(yáng)性；不變，陰性。

Christenten氏培養(yǎng)基法：培養(yǎng)基變紅色，陽(yáng)性；不變（黃色），陰性。

常見(jiàn)菌種實(shí)驗(yàn)結(jié)果

常見(jiàn)腸桿菌科中與獸醫(yī)學(xué)有關(guān)的主要屬的生化特性

試驗(yàn)或培養(yǎng)基埃希菌屬志賀菌屬沙門菌屬克雷伯菌屬腸桿菌屬變形菌屬耶爾森菌屬
吲哚+V---VV
甲基紅+++V-++
VP---V+V-
枸櫞酸鹽利用（西蒙氏）--+V+V-

注

：+：90%~100%陽(yáng)性；-：0~10%陰性；V：種間有不同反應(yīng)