正文

熒光偏振免疫分析法(fluorescence polarization immunoassay，F(xiàn)PIA)是一種定量免疫分析技術(shù)，偏振熒光的強(qiáng)弱程度與熒光分子的大小呈正相關(guān)，與其受激發(fā)時轉(zhuǎn)動的速度呈反相關(guān)。FPIA最適宜檢測小至中等分子物質(zhì)，常用于藥物、激素的測定。

熒光偏振免疫分析常用于測定半抗原的藥物濃度。反應(yīng)系統(tǒng)內(nèi)除待測抗原外，同時加入一定量用熒光素標(biāo)記的小分子抗原，使二者與有限量的特異性大分子抗體競爭結(jié)合。當(dāng)待測抗原濃度高時，經(jīng)過競爭反應(yīng)，大部分抗體被其結(jié)合，而熒光素標(biāo)記的抗原多呈游離的小分子狀態(tài)。由于其分子小，在液相中轉(zhuǎn)動速度較快，測量到的熒光偏振程度也較低。反之，如果待測抗原濃度低時，大部分熒光素標(biāo)記抗原與抗體結(jié)合，形成大分子的抗原抗體復(fù)合物，此時檢測到的熒光偏振程度也較高。熒光偏振程度與待測抗原濃度呈反比關(guān)系。我們測定待測抗原標(biāo)準(zhǔn)品后制標(biāo)準(zhǔn)曲線。通過檢測反應(yīng)系中偏振光的大小，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上就可以精確地得知樣品中待測抗原的相應(yīng)含量。